本书分两个部分，11个实验单元共33个实验。第一部分“基因工程基本技术”共设置了基因组的提取与检测、核外DNA提取、核酸电泳与回收、从低熔点胶琼脂糖凝胶中回收DNA片段、感受态细胞的制备、重组质粒的连接、转化和筛选、DNA扩增技术、cDNA文库的构建、Southern杂交、Northern杂交和菌落原位杂交、蛋白质印迹分析等实验单元；第二部分“应用基因工程技术”共设置了环境基因组DNA的提取、荧光定量PCR、DGGE、分子杂交、16S RNA及Blast和系统树软件应用、荧光基因标记等分子生态学和分子鉴定实验单元，以及综合性实验单元：赤霉素基因工程菌的构建及其发酵和产物分离。本书各实验单元可按照各校的实际情况自行拆分组合，便于师生根据课时及学习需求灵活选择。本书可供高等院校生物工程、生物技术及相关专业的师生参考，也可作为科研及技术人员的参考书。

本书内容涵盖基因克隆、重组、表达、提取、纯化以及检测的常用基因工程技术操作实，分“基因工程基本技术”和“应用基因工程技术”两个大类型共33个实验，既注重培养学生的基本操作技能，又利于启发学生分析和解决问题的能力。书中的实验可自行拆分，便于师生根据课时及学习需求灵活选择。书后附有实验操作常用的试剂配方及相关操作注意事项等参阅资料。

本书可供高等院校生物工程、生物技术及相关专业的师生参考，也可作为科研及技术人员的参考书。

第一部分 基因工程基本技术

第一章 基因组的提取与检测

实验11植物基因组DNA的提取

实验12动物基因组DNA的提取

实验13细菌基因组DNA的制备

实验14病毒基因组DNA的提取

实验15基因组DNA的检测

第二章 核外DNA提取

实验21质粒DNA提取

实验22线粒体DNA的提取

实验23叶绿体DNA的提取

第三章 核酸电泳与回收

实验31DNA琼脂糖凝胶电泳

实验32RNA琼脂糖凝胶电泳

实验33从低熔点琼脂糖凝胶中回收DNA片段

实验34聚丙烯酰胺凝胶电泳

第四章 重组质粒的连接、转化和筛选

实验41感受态细胞的制备

实验42重组质粒的连接、转化及筛选原理

实验43电穿孔仪基因转移

第五章 DNA扩增和cDNA文库的构建

实验51PCR扩增目的DNA

实验52cDNA文库的构建

第六章 分子杂交

实验61Southern杂交

实验62Northern杂交

实验63菌落原位杂交

实验64斑点杂交

第七章 蛋白质印迹分析

实验71蛋白质印迹分析

第二部分 应用基因工程技术

第八章 微生物分子生态研究

实验81环境微生物总DNA的提取

实验82DGGE分析微生物的多样性

实验83实时荧光定量PCR

第九章 分子鉴定

实验91荧光原位杂交实验

实验9216S rDNA序列分析及Blast和系统树软件

第十章 荧光蛋白基因标记技术

实验101含荧光蛋白基因质粒DNA的分离

实验102含荧光蛋白基因质粒DNA限制性酶切图谱分析

实验103感受态细胞制备与含荧光蛋白基因质粒DNA转化

第十一章 赤霉素基因工程菌构建及其发酵和分离

实验111赤霉素基因工程菌构建

实验112赤霉素基因工程菌的发酵

实验113赤霉素分离及检测

附录

附录1 常用试剂的母液配方

附录2 常用的抗生素

附录3 玻璃和塑料器皿的硅化

附录4 菌种与DNA的保存

附录5 器皿的清洗处理

附录6 氨基酸与遗传密码子

附录7 核酸、蛋白质换算数据

附录8 基因工程技术相关试剂和仪器销售公司列举

参考文献