丛书序

丛书前言

第一章 Annexin V—EGFP基因克隆与表达载体构建

实验l AnneXin V表达序列检索

1．实验目的

2．实验原理

3．实验方法与结果

实验2 AnneXin V—EGFP基因克隆设计

1．实验目的

2．实验原理

3．实验方法

实验3 哺乳动物细胞中提取RNA

工．实验目的

2．实验原理（异硫氰酸胍酚氯仿一步法）

3．实验仪器与器材

4．试剂与配制

5．实验步骤

6．实验结果分析与讨论

7．思考题

实验4 逆转录PCR与产物鉴定

1．实验目的

2．实验原理

3．实验方法

4．实验步骤

5．实验结果与讨论

实验5 PCR产物的酶切与克隆

1．实验目的

2．实验原理

3．实验仪器与器材

4．试剂与配制

5．实验步骤

实验6 克隆鉴定

1．实验目的

2．实验原理

3．实验仪器与器材

4．试剂与配制

5．实验步骤

实验7 大肠杆菌感受态的制备

l。实验目的与要求

2．实验原理

3．实验仪器与器材

4．试剂与配制

5。实验步骤

参考文献

第二章 Annexin V—EGFP质粒的扩增与提取

实验8 Annexin V—EGFP质粒的扩增

1．实验目的

2．实验仪器与器材

3．试剂与配制

4．实验原理

5．实验步骤

实验9 Annexin V—EGFP质粒的提取

1．实验目的

2．实验原理与方法

3．实验仪器与器材

4。试剂与配制

5．实验步骤

6．质粒提取常见问题

参考文献

第三章 Annexin V—EGFP基因的表达与纯化

实验l0 Annaexin V—EGFP基因的表达

1．实验目的

2．实验原理

3．实验仪器与器材

4．试剂与配制

5．实验步骤

6．注意事项

7．讨论

8．思考题

实验11 Ni—NTA亲和层析纯化融合蛋白His6一EGFP—AnneXin V

1．实验目的

2．实验原理

3．实验仪器与器材

4．试剂与配制

5．实验方法

6．注意事项

7．讨论

8．思考题

参考文献

第四章 Annexin V—EGFP重组蛋白质的应用检测

实验12 SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质

1．实验目的

2．实验原理

3．实验仪器与器材

4．试剂与配制

5．实验方法

6．注意事项

7．讨论

8．思考题

实验13 蛋白质转移印迹法检测AnncXin V—EGFP基因表达

1．实验目的

2．实验原理

3．实验试剂

4．实验仪器

5．实验步骤

6．注意事项

7．讨论

8．思考题

实验14 流式细胞仪检测凋亡细胞

1．实验目的

2．实验原理

3．实验试剂

4．实验仪器

5．实验步骤

6．注意事项

7．扩展

8．思考题

实验15 荧光显微镜检测

1．实验目的

2．实验原理

3．实验试剂

4．实验仪器

5．实验步骤

6．注意事项

7．扩展

8．思考题

参考文献

附录

1．氨基酸密码子表

2．酶切位点保护碱基表

3．SDS-PAGE分离胶配方表

4．SDS-PAGE浓缩胶配方表

5．网络资源

基因工程是一门实用性很强的学科，涉及生命科学的多学科领域。殷武编著的《基因工程实验(Annexin V-EGFP重组蛋白质的克隆表达与检测)》以用于检测细胞凋亡的Annexin V—EGFP为例，系统介绍了从基因克隆、蛋白质表达纯化、蛋白质功能检测到最后应用方面的实验方法。

《基因工程实验(Annexin V-EGFP重组蛋白质的克隆表达与检测)》适用于初步接触基因工程实验的高年级本科生，或从事相关研究的科研人员。

殷武编著的《基因工程实验(Annexin V-EGFP重组蛋白质的克隆表达与检测)》以具体的ANNEXINV-EGFP（ANNEXINV绿色荧光蛋白）为例系统介绍基因工程中从基因克隆、鉴定、表达与纯化的一系列实验。让学生对基因工程实验过程有更为系统与全面的认识，激发学生学习基因工程的兴趣，并掌握基因工程中基本的知识与技能。