本书是一部关于分子生物学的实验教材，全书介绍了现代分子生物学基本的、综合性的和一些最新的实验方法和技术，在此基础上为训练学生的综合素质和独立从事实验的能力，增加了探索性实验。

本书介绍了现代分子生物学基本的、综合性的和一些最新的实验方法和技术，在此基础上为训练学生的综合素质和独立从事实验的能力，增加了探索性实验。全书共分为三篇。基础篇介绍了基因克隆与分析方法，训练学生从事分子生物学实验方法和操作技能。其中高通量基因克隆技术(GATEWAY cloning technology)使以往困难费时的实验变得简单易行，可以称为是基因克隆技术的重大革命。应用篇介绍了克隆基因在转基因植物及基因功能分析的具体应用。通过几个系统的综合性实验，不但提高学生的实验操作技能，更重要的是使学生在掌握方法的基础上，增强综合运用、实验设计及观察分析能力。其中以烟草脆裂病毒为载体通过基因沉默分析基因功能及酵母双杂系统，提供基因功能研究的新手段，使原来无法开展的一些研究得以进行。探索篇在前两部分基本训练的基础上，针对科研中可能会遇到的一些实际问题，独立设计解决问题的具体方案，并通过实验操作激励学生进入科研状态，提高学生的科研兴趣及解决实际问题的综合素质与能力。

本书可以作为生物技术、生物工程专业本科生教材和相关学科科研人员的参考用书。

      基 础 篇

实验1 碱法提取质粒

实验2 煮沸法提取质粒

实验3 质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳

实验4 质粒的限制性内切酶反应分析

实验5 用玻璃奶回收琼脂糖凝胶中的DNA

实验6 DNA的连接

实验7 E.coli DH5α感受态细胞的制备及转化

实验8 植物总RNA的提取

实验9 聚合酶链反应——PCR

实验10 CDNA末端快速扩增——RACE

实验11 高通量基因克隆技术

实验12 银染法DNA序列测定

       应 用 篇

实验13 原核细胞中外源基因的表达和初步纯化

实验14 蛋白质的SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳

实验15 昆虫细胞中外源基因的表达

实验16 蛋白质的Weatern印迹分析

实验17 土壤农杆菌介导的烟草基因转化

实验18 应用微弹轰击法进行兰花基因转化

实验19 植物总DNA的提取

实验20 DNA探针的制备

实验21 DNA的Southern印迹分析(用同位素标记探针)

实验22 DNA的Southern印迹分析(用Dig标记探针)

实验23 mRNA的Northern印迹分析(用Dig标记探针)

实验24 酵母双杂系统研究蛋白质的相互作用

实验25 CytoTrap酵母双杂系统研究蛋白质的相互作用

实验26 DNA一蛋白质的相互作用

实验27 蛋白质核酸结合活性的分析

实验28 以烟草脆裂病毒为载体通过基因沉默分析植物基因功能

实验29 水稻突变体库的创建

实验30 转基因水稻突变体T—DNA侧翼序列的扩增与分析

          探 索 篇

实验31 亚克隆及检测的独立设计与操作

实验32 土壤农杆菌感受态细胞的制备和转化

实验33 不同植物材料组织的再生培养

实验34 在酵母细胞中表达外源基因

实验35 应用Bac—to—Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达蛋白

实验36 检测蛋白质的相互作用——Protein Overlay

实验37 沉默转G.US基因烟草中的GUS基因

实验38 拟南芥T—DNA突变库的构建

实验39 用RNAi的方法研究拟南芥基因功能

主要参考资料